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Tak1双切口酶质粒(m) | sc-424044-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Map3k7 编码 TAK1(TGF-β 激活的激酶 1),是一种 MAP3K,能够整合来自促炎性细胞因子与模式识别受体的信号,从而调控应激反应相关的转录程序。TAK1 是一个关键枢纽,通过连接 TAB 蛋白、TRAF 复合体等上游适配子,激活 NF-κB、JNK 和 p38 MAPK 通路,进而调节先天免疫信号传导、细胞存活、凋亡与分化。在实验模型中,扰动 Map3k7 会重塑炎症反应、上皮与基质稳态以及组织重塑过程,因此与免疫失调、纤维化和致癌信号等研究情境密切相关。其所处的通路位置也使其成为解析 TGF-β、TNF、IL-1 与 TLR 信号模块之间串话的有用工具。
Tak1 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Map3k7 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Map3k7内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Map3k7的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Map3k7基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。