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SYP/Synaptophysin双切口酶质粒(h) | sc-400487-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
SYP/Synaptophysin双切口酶质粒(h2) | sc-400487-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
SYP 编码突触小泡蛋白 synaptophysin(突触泡蛋白),它是一种在突触小泡膜上高度丰富的整合膜糖蛋白,支持突触前小泡的生物发生、运输以及 Ca²⁺ 依赖性的神经递质释放。Synaptophysin 可通过与突触小泡蛋白(如 synaptobrevin/VAMP2)的相互作用参与小泡回收以及内吞/外排过程的耦联,从而与突触传递和神经网络活动相关。由于 SYP 被广泛用作突触密度和突触前完整性的标志物,其表达水平或分布的改变常在神经退行性疾病、神经发育障碍和突触功能异常的研究中被重点检测。它与小泡相关的定位也使其在研究神经元分化、可塑性以及由疾病相关通路驱动的环路层面变化时具有重要意义。
SYP/Synaptophysin 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SYP 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SYP内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SYP的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SYP基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。