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Syntaxin 17双切口酶质粒(h) | sc-403251-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Syntaxin 17双切口酶质粒(h2) | sc-403251-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
STX17 编码 Syntaxin 17,这是一种锚定于内质网(ER)的 SNARE 蛋白,定位于线粒体相关膜(MAM)和自噬体,并通过促进自噬体与溶酶体融合来介导自噬的晚期阶段。STX17 通过与 SNAP29 和 VAMP8 的相互作用,维持自噬通量、细胞器质量控制以及细胞对营养胁迫的适应,进而影响线粒体稳态与先天免疫信号传导。STX17 依赖的转运与自噬过程一旦受扰动,已被关联到线粒体自噬改变与蛋白稳态失衡;这些过程与神经退行性变、癌细胞对胁迫的耐受以及炎症表型等具有相关性。作为连接膜融合与选择性自噬的关键节点,STX17 常被用于研究调控溶酶体功能、线粒体更新以及细胞在胁迫下存活的相关通路。
Syntaxin 17 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 STX17 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对STX17内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏STX17的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了STX17基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。