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Synaptojanin 2慢病毒激活颗粒(m) | sc-423241-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
小鼠 Synj2 编码突触肌醇磷酸酶 2(synaptojanin 2),这是一种磷脂酰肌醇 5-磷酸酶,可水解 PI(4,5)P2 及相关脂质,从而塑造膜的身份特征与信号传导。通过调控磷脂酰肌醇的周转,突触肌醇磷酸酶 2 在膜重塑位点支持网格蛋白介导的内吞作用、囊泡运输以及肌动蛋白细胞骨架动力学。这些功能与受体内化及其下游信号通路相交织,进而在特化细胞类型中调控增殖、迁移以及突触或分泌相关过程。磷脂酰肌醇代谢失衡与内吞运输异常在神经生物学及与癌症相关的细胞行为中被广泛认为具有重要作用,因此 Synj2 是开展膜信号机制研究的一个有用节点。
Synaptojanin 2 慢病毒激活颗粒(m)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Synj2 表达。
Synaptojanin 2 慢病毒激活颗粒(m)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在Synj2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Synaptojanin 2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 Synj2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。