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SWAP-70双切口酶质粒(h2) | sc-403465-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类SWAP70基因编码SWAP-70,这是一种可结合磷脂酰肌醇的信号衔接蛋白,位于PI3K下游并被招募至活化膜结构处,支持依赖Rho家族GTP酶的肌动蛋白细胞骨架重塑。SWAP-70通过协调细胞骨架动力学与受体驱动的信号传导,参与免疫细胞的激活、黏附与迁移,涉及B细胞应答、抗原依赖性转运以及吞噬功能等过程。SWAP70相关通路的失调也在免疫功能障碍以及肿瘤细胞运动性/侵袭性的研究背景下受到关注,因为肌动蛋白重塑的改变会影响细胞行为。对SWAP70进行扰动的模型可用于机制层面研究PI3K–Rac/Rho信号、膜运输以及由细胞骨架控制的表型,并可借助基因编辑检验其对迁移、形态及刺激依赖性信号输出的影响。
SWAP-70 双切酶质粒(h2)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SWAP70 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SWAP70内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SWAP70的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SWAP70基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。