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Superoxide Dismutase 3/SOD3CRISPR激活质粒(h) | sc-402505-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
人类 SOD3 基因编码细胞外超氧化物歧化酶 3(extracellular superoxide dismutase 3),这是一种分泌型的 Cu/Zn 金属酶,可在细胞外空间及血管周围基质中催化超氧阴离子歧化生成过氧化氢和氧气。SOD3 通过限制活性氧(ROS)并维持一氧化氮(NO)的生物可利用性,影响氧化还原稳态、内皮信号传导以及细胞外基质重塑相关通路。SOD3 的表达或活性发生改变与氧化应激驱动的机制相关,而这些机制被认为参与心血管与肺部疾病的病理生理过程、炎症性组织损伤以及肿瘤微环境动态变化。作为关键的细胞外抗氧化因子,SOD3 常被用于血管生物学、纤维化、免疫细胞迁移以及氧化还原调控的转录程序等研究场景。
Superoxide Dismutase 3/SOD3 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SOD3的表达。
Superoxide Dismutase 3/SOD3 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SOD3基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SOD3转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Superoxide Dismutase 3/SOD3表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SOD3位点,并能够研究内源性位点上依赖于Superoxide Dismutase 3/SOD3的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SOD3表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Superoxide Dismutase 3/SOD3通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。