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SUMO-2双切口酶质粒(h) | sc-401111-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
SUMO-2双切口酶质粒(h2) | sc-401111-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
SUMO2 编码 SUMO-2,这是一种类泛素修饰蛋白,可通过 SUMO 化与底物蛋白发生共价连接,从而调控蛋白的定位、稳定性以及蛋白—蛋白相互作用。SUMO-2/3 修饰会在细胞应激时迅速被诱导,并在 E1(SAE1/SAE2)、E2(UBE2I/UBC9)以及 PIAS 家族等 E3 连接酶的协同作用下,参与 DNA 损伤应答、染色质组织、转录调控和细胞周期控制。通过精细调节 NF-κB 信号、p53 介导的检查点以及复制应激耐受等通路,SUMO-2 有助于维持蛋白稳态与基因组完整性。SUMO 化失衡与肿瘤发生、神经退行性变以及炎症信号相关,因此 SUMO2 是机制研究中具有广泛意义的关键节点。
SUMO-2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SUMO2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SUMO2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SUMO2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SUMO2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。