SUMO-2CRISPR激活质粒(h): sc-401111-ACT

人类 SUMO2 基因编码 SUMO-2，这是一种类泛素修饰因子，可在动态的翻译后修饰循环中与靶蛋白发生共价连接，从而调控蛋白稳定性、亚细胞定位以及大分子复合体的组装。依赖 SUMO-2 的 SUMO 化通过 SUMO E1/E2/E3 酶级联反应以及由 SENP 蛋白酶协调介导的去 SUMO 化过程，影响 DNA 损伤信号传导与修复、染色质组织、转录调控和细胞周期进程。SUMO-2 能形成多聚 SUMO 链，并与 SUMO 靶向型泛素连接酶发生互作，将 SUMO 化与蛋白稳态维持及应激适应性反应联系起来。SUMO2 活性失调和 SUMO 化模式改变常在致癌信号传导、神经退行性变以及炎症应激等研究背景中被关注，这些情境往往涉及转录与基因组维护层面的网络性变化。

SUMO-2 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SUMO2的表达。

SUMO-2 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的SUMO2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于SUMO2转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性SUMO-2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的SUMO2位点，并能够研究内源性位点上依赖于SUMO-2的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SUMO2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟SUMO-2通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。