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Stomatin双切口酶质粒(h) | sc-402491-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Stomatin双切口酶质粒(h2) | sc-402491-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 STOM 基因编码 stomatin(硬膜蛋白),这是一种与膜相关的支架蛋白,富集于脂筏结构,可帮助在质膜上组织离子通道和转运体。Stomatin 参与调控机械敏感性与酸敏感性离子通道的活性、膜曲率以及囊泡运输,因此与渗透调节和信号转导等细胞过程相关。它在红细胞中高表达,可维持膜稳定性并参与红细胞稳态。stomatin 的表达水平或定位发生改变与红细胞膜疾病(包括遗传性口形红细胞增多症)有关,同时也与膜兴奋性更广泛的变化相关,这些变化在神经生物学与肿瘤生物学研究中具有意义。
Stomatin 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 STOM 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对STOM内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏STOM的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了STOM基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。