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Stim1双切口酶质粒(h) | sc-401311-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Stim1双切口酶质粒(h2) | sc-401311-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
STIM1(基质相互作用分子1)是一种驻留于内质网(ER)的 Ca2+ 传感器,它通过在 ER–质膜连接处与 ORAI 通道结合,将内质网腔内钙库的耗竭与贮存操纵性钙进入(SOCE)的激活相耦联。通过调控胞质 Ca2+ 动态,Stim1 协调多条下游信号通路,包括钙调神经磷酸酶–NFAT 的转录程序、细胞骨架重塑,以及钙依赖性的增殖与分泌调控。STIM1 依赖的 SOCE 是免疫细胞激活及更广泛应激反应信号的核心环节,而 STIM1 功能或表达的改变已与免疫功能障碍、肌病以及肿瘤相关的钙信号表型有关。这些特性使 STIM1 成为在人类细胞模型中解析钙信号网络与刺激耦联转录反应时常用的关键节点。
Stim1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 STIM1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对STIM1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏STIM1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了STIM1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。