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STC1CRISPR激活质粒(h) | sc-401423-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
STC1CRISPR激活质粒(h2) | sc-401423-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
STC1(stanniocalcin 1,斯坦尼钙素1)编码一种分泌型糖蛋白激素,参与钙和磷稳态的维持,并在更广泛层面调控细胞应激反应。在人类细胞中,STC1会影响线粒体功能、对氧化应激的耐受性、与炎症相关的信号传导以及血管生成相关程序,并被报道与缺氧应答的转录网络存在关联。STC1表达的改变与肿瘤生物学、缺血性损伤以及代谢和纤维化表型有关,使其成为研究微环境适应的一个有价值节点。这些功能使STC1在多种组织环境中成为调节细胞存活、迁移以及旁分泌通讯的因子。
STC1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性STC1的表达。
STC1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的STC1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于STC1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性STC1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的STC1位点,并能够研究内源性位点上依赖于STC1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在STC1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟STC1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。