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Stat3双切口酶质粒(m) | sc-423176-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Stat3双切口酶质粒(m2) | sc-423176-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Stat3 基因编码信号转导与转录激活因子 3(STAT3),这是一种潜在的转录因子,在细胞因子和生长因子受体的下游被激活。STAT3 经 JAK 激酶或受体相关酪氨酸激酶磷酸化后发生二聚化,并转位入细胞核,调控控制细胞增殖、生存、炎症反应以及干细胞样细胞状态的基因程序。STAT3 信号整合 IL‑6 家族细胞因子的输入,并与 NF‑κB、PI3K–AKT 和 MAPK 等通路交叉,共同塑造免疫与组织稳态。STAT3 活性失调常在慢性炎症、免疫功能障碍、纤维化和致癌转化等模型中被研究,用以界定情境特异性的转录与表观遗传输出。
Stat3 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Stat3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Stat3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Stat3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Stat3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。