
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
StARCRISPR激活质粒(h) | sc-400961-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
人类 STAR 基因编码类固醇生成急性调节蛋白(StAR)。StAR 是一种与线粒体相关的因子,介导胆固醇从线粒体外膜向内膜转运这一限速步骤,从而支持类固醇激素的生物合成。该转运步骤对 CYP11A1 生成孕烯醇酮至关重要,并与肾上腺和性腺细胞中由 cAMP/PKA 驱动的类固醇生成信号通路相衔接。StAR 的破坏或失调会改变线粒体胆固醇的处理及其下游的类固醇生成过程,使 STAR 与内分泌和生殖表型相关联,并为研究线粒体脂质转运与类固醇生成代谢提供机制切入点。因此,STAR 常在肾上腺与性腺功能、应激信号以及激素生成的代谢调控等模型中被广泛研究。
StAR CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性STAR的表达。
StAR CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的STAR基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于STAR转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性StAR表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的STAR位点,并能够研究内源性位点上依赖于StAR的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在STAR表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟StAR通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。