ST2CRISPR激活质粒(h): sc-402390-ACT

人类 IL1RL1 基因编码 ST2，ST2 是白细胞介素-1 受体家族成员，作为 IL-33 的信号受体参与先天与适应性免疫调控。ST2 激活后会启动 MyD88 依赖性通路，进而触发 NF-κB 与 MAPK 信号传导，影响细胞因子产生、细胞募集以及组织重塑等反应。IL-33/ST2 轴与 2 型炎症和免疫稳态密切相关，在气道炎症、过敏性疾病生物学以及心血管炎症等背景中具有重要意义。在慢性炎症等情况下，ST2 信号失调也受到研究关注，因为上皮细胞与免疫细胞之间的串话会影响与疾病相关的转录程序。

ST2 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性IL1RL1的表达。

ST2 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的IL1RL1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于IL1RL1转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性ST2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的IL1RL1位点，并能够研究内源性位点上依赖于ST2的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在IL1RL1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟ST2通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。