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SSX1CRISPR激活质粒(h) | sc-403551-ACT | 20 µg | $397.00 | |||
SSX1CRISPR激活质粒(h2) | sc-403551-ACT-2 | 20 µg | $397.00 |
SSX1(滑膜肉瘤,X 断点 1)编码一种类似癌睾抗原的核蛋白,参与转录调控及与染色质相关的过程。已有研究报道其相互作用提示 SSX1 与 Polycomb 相关的转录抑制以及基因表达的表观遗传调控有关。SSX1 的活性可通过影响转录网络来调节发育程序、细胞身份与分化状态。SSX 家族的异常表达在滑膜肉瘤中最为典型,主要通过 SS18–SSX 融合致癌基因实现,其可重塑染色质重构与转录程序。因此,SSX1 作为基因调控失衡的标志物,在肿瘤生物学、表观遗传学以及与免疫肿瘤学相关的抗原表达研究中被广泛关注。
SSX1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SSX1的表达。
SSX1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SSX1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SSX1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性SSX1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SSX1位点,并能够研究内源性位点上依赖于SSX1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SSX1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟SSX1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。