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SSTR2CRISPR激活质粒(h) | sc-401618-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
生长抑素受体2(SSTR2)是一种与 Gi/o 蛋白偶联的 G 蛋白偶联受体(GPCR),介导生长抑素对激素分泌、神经元兴奋性以及细胞信号传导的抑制作用。配体结合后,SSTR2 抑制腺苷酸环化酶,从而降低 cAMP/PKA 信号;调节离子通道活性;并可在特定情境下参与 MAPK/ERK 和 PI3K 相关通路,对细胞增殖与分化产生依赖环境的影响。受体通过 β-arrestin 相关过程发生内吞与再循环/去敏化,进一步塑造信号动态与细胞反应性。SSTR2 表达改变在神经内分泌生物学与肿瘤模型系统中被广泛用作分子特征,用于支持受体转运、内分泌调控以及 GPCR 网络重塑等研究。
SSTR2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SSTR2的表达。
SSTR2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SSTR2基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SSTR2转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性SSTR2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SSTR2位点,并能够研究内源性位点上依赖于SSTR2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SSTR2表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟SSTR2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。