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SRPK2双切口酶质粒(h) | sc-403763-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
SRPK2双切口酶质粒(h2) | sc-403763-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
SRPK2(丝氨酸/精氨酸富集蛋白特异性激酶2)是一种双特异性激酶,可对SR剪接因子进行磷酸化,从而协调剪接体的组装与pre-mRNA的可变剪接。通过调控RNA加工过程,SRPK2会影响细胞周期进程、应激信号传导以及蛋白质组多样化,并且在功能上可与由激酶驱动、塑造转录及转录后基因调控的通路发生交叉。文献报道SRPK2活性改变与剪接程序失调以及异常的增殖或应激适应表型相关,因此它是研究癌症及其他存在剪接缺陷疾病中RNA生物学的一个有用节点。
SRPK2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SRPK2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SRPK2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SRPK2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SRPK2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。