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Src双切口酶质粒(m) | sc-423151-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Src双切口酶质粒(m2) | sc-423151-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠 Src 基因编码非受体型酪氨酸激酶 Src,它是整合素、受体酪氨酸激酶以及免疫受体下游信号传导的核心调控因子。Src 的活性协调一系列磷酸化级联反应,进而控制细胞骨架重塑、黏着斑动态变化、细胞周期进程,以及包括 PI3K–AKT 和 MAPK/ERK 在内的存活通路。通过这些网络,Src 在实验模型中影响细胞迁移、与侵袭相关的程序以及上皮–间质转化(EMT)相关过程。Src 信号失调常与肿瘤发生转化和转移表型有关,因此 Src 常被用作解析疾病相关情境下异常激酶信号的关键节点。
Src 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Src 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Src内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Src的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Src基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。