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SRA双切口酶质粒(h) | sc-404308-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
SRA双切口酶质粒(h2) | sc-404308-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
SRA1 编码类固醇受体 RNA 激活因子 1(SRA),这是一种兼具多种功能的 RNA 与蛋白质共调控因子,可调节由核受体及其他转录因子控制的转录程序。SRA 参与染色质重塑以及转录复合体的组装,从而影响激素应答基因的表达,将类固醇信号与更广泛的表观遗传和 RNA 介导的调控过程耦联起来。通过这些作用,SRA1 与细胞分化、代谢调控以及应激响应相关的转录输出等通路有关。已有研究报道在多种与激素相关及增殖性疾病背景中存在 SRA1/SRA 表达失调,支持其作为解析转录网络扰动机制的研究靶点。
SRA 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SRA1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SRA1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SRA1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SRA1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。