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SR-B1CRISPR激活质粒(h) | sc-400990-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
SR-B1CRISPR激活质粒(h2) | sc-400990-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
SCARB1 编码清道夫受体B类1型(SR-B1),这是一种多配体的细胞表面受体,可介导从高密度脂蛋白(HDL)中选择性摄取胆固醇酯,并协调双向脂质转运。SR-B1 有助于调控细胞胆固醇稳态与膜成分,从而影响类固醇生成输出、脂滴动态以及肝细胞和类固醇生成组织中的脂蛋白代谢。通过这些功能,SR-B1 与调控脂质处理和炎症信号的通路发生交互,包括对氧化应激反应以及先天免疫受体活性的调节。SCARB1/SR-B1 活性异常与血脂异常和动脉粥样硬化相关表型有关,并常被用于研究其在人类细胞中参与代谢重塑及与疾病相关的脂质信号传导作用。
SR-B1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SCARB1的表达。
SR-B1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SCARB1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SCARB1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性SR-B1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SCARB1位点,并能够研究内源性位点上依赖于SR-B1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SCARB1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟SR-B1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。