Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Squalene synthetase Antibody (A-7): sc-271602. Western blot analysis of Squalene synthetase expression in HeLa (A), K-562 (B) and HCT-116 (C) whole cell lysates. Detection reagent used: m-IgG1 BP-HRP: sc-525408.
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Squalene synthetase双切口酶质粒(h): sc-403845-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- Squalene synthetase 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- Squalene synthetase双切酶质粒（h）和Squalene synthetase双切酶质粒（h2）编码针对FDFT1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：Squalene synthetase: sc-271602，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
Squalene synthetase双切口酶质粒(h) | sc-403845-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Squalene synthetase双切口酶质粒(h2) | sc-403845-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
FDFT1 编码角鲨烯合酶，这是一种与内质网相关的酶，可催化甾醇生物合成中第一个关键承诺步骤：将两分子法呢基二磷酸转化为角鲨烯。该反应把甲羟戊酸（mevalonate）途径与下游胆固醇生成连接起来，从而协同调控膜生物发生、脂筏组织以及类固醇衍生代谢物的合成。通过控制进入甾醇合成的代谢通量，角鲨烯合酶影响细胞脂质稳态以及对胆固醇敏感的转录程序的反馈调控。FDFT1 依赖的甾醇代谢失衡已在代谢与心血管生物学、神经生物学，以及甲羟戊酸途径活性发生改变的增殖状态等研究背景中受到关注。
Squalene synthetase 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 FDFT1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对FDFT1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏FDFT1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了FDFT1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。