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Squalene epoxidase双切口酶质粒(h) | sc-402870-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Squalene epoxidase双切口酶质粒(h2) | sc-402870-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
SQLE 编码角鲨烯环氧化酶(squalene epoxidase),这是一种黄素依赖型单加氧酶,可催化角鲨烯环氧化生成 2,3‑氧化角鲨烯,是胆固醇和甾醇生物合成早期影响速率的关键步骤之一。作为一种与内质网相关的酶,它有助于调控甾醇稳态,并与甲羟戊酸(mevalonate)途径通量、脂滴动态以及膜成分的反馈调控相互整合。SQLE 活性的扰动可重塑细胞脂质谱,影响信号平台并改变细胞在应激条件下的代谢适应。涉及 SQLE 的甾醇生物合成调控异常与血脂异常相关表型及多种疾病背景下观察到的代谢重编程有关,因此 SQLE 常被用作脂质代谢研究中的机制性关键节点。
Squalene epoxidase 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SQLE 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SQLE内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SQLE的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SQLE基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。