Date published: 2026-7-27

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Sprr1b双切口酶质粒(m): sc-423137-NIC

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • Sprr1b 双切口酶质粒(m)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • Sprr1b双切酶质粒(m)和Sprr1b双切酶质粒(m2)编码针对Sprr1b的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
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    Sprr1b双切口酶质粒(m)

    sc-423137-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    Sprr1b双切口酶质粒(m2)

    sc-423137-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    Sprr1b(small proline-rich protein 1B,小富脯氨酸重复蛋白1B)是小鼠角化包膜(cornified envelope)的前体成分之一,在角质形成细胞终末分化过程中会被转谷氨酰胺酶交联,从而促进表皮屏障形成并增强机械韧性。其表达可在上皮应激与分化信号的下游被诱导,且常用作鳞状分化程序的标志物,这类程序涉及EGFR/MAPK通路以及由AP-1调控的转录反应。除皮肤外,Sprr1b也可在受损上皮与再生组织中上调,提示其在屏障修复及细胞对损伤的适应中发挥作用。SPRR家族表达失调与角化过度和炎症性皮肤状态以及上皮重塑等情境相关,因此Sprr1b与屏障功能障碍和上皮应激生物学研究密切相关。

    Sprr1b 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Sprr1b 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Sprr1b内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Sprr1b的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Sprr1b基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。