Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SphK1双切口酶质粒(h): sc-401274-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- SphK1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- SphK1双切酶质粒（h）和SphK1双切酶质粒（h2）编码针对SPHK1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：SphK1: sc-365401，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SphK1双切口酶质粒(h) | sc-401274-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
SphK1双切口酶质粒(h2) | sc-401274-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
SPHK1 编码鞘氨醇激酶 1（SphK1），这是一种脂质激酶，可将鞘氨醇磷酸化生成鞘氨醇-1-磷酸（S1P）。S1P 是一种具有生物活性的鞘脂，可影响细胞存活、增殖、迁移以及炎症信号传导。通过改变促凋亡的神经酰胺/鞘氨醇与促存活的 S1P 之间的平衡，SphK1 参与“鞘脂流变开关”（sphingolipid rheostat），并整合来自生长因子与细胞因子通路的输入。SphK1 产生的 S1P 既可在细胞内发挥作用，也可通过 S1P 受体调控下游程序，包括 MAPK/ERK、PI3K/AKT、NF-κB 以及血管生成相关反应。SPHK1/S1P 信号失调与肿瘤相关表型、纤维化以及免疫介导的炎症有关，因此它是疾病相关信号网络中被广泛研究的关键节点。
SphK1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 SPHK1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SPHK1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏SPHK1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了SPHK1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。