Date published: 2026-7-21

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SPACR CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-406681

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说明书
  • 针对种属:human
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • SPACR CRISPR/Cas9 基因敲除(KO)质粒(h) 是一组质粒混合物,每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA(gRNA),其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列,旨在实现最高的基因敲除效率
  • gRNA序列引导Cas9在SPACR基因组位点诱导位点特异性双链断裂(DSBs),从而通过非同源末端连接(NHEJ)实现基因敲除
  • 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点,因此在建立稳定的基因敲除细胞系后,可以通过 Cre 重组酶(Cre 向量:sc-418923)去除选择标记。
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:SPACR: sc-377366,通过WB, IF或者IHC分析
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    SPACR CRISPR/Cas9 KO质粒 (h)

    sc-406681
    20 µg
    CNY2986.00

    概述

    IMPG1 编码 SPACR,这是一种大型分泌型蛋白聚糖,是视网膜光感受器间质(interphotoreceptor matrix)的关键结构成分,并有助于光感受器外节与视网膜色素上皮(RPE)之间的黏附与间距维持。通过广泛的糖基化以及与其他细胞外基质成分的相互作用,SPACR 支持基质的组织架构、信号分子的扩散,并维持光感受器的稳态。IMPG1 的功能受损与多种遗传性视网膜疾病(包括黄斑营养不良)相关,凸显其在细胞外基质完整性及光感受器存活通路研究中的重要性。作为一种视网膜富集的基质蛋白,SPACR 也常用于研究细胞周围基质如何调控神经上皮中的细胞间通讯与应激反应。

    SPACR CRISPR/Cas9 KO质粒(h)是一组旨在针对性地破坏human细胞系中IMPG1基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA(sgRNA),该sgRNA针对IMPG1基因内的特定位点,并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP,可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

    多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后,产生破坏IMPG1开放阅读框的插入或缺失(indels)的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接(NHEJ)途径修复,通常会导致移码突变,从而使SPACR蛋白表达失活。

    该CRISPR敲除系统能够高效构建IMPG1缺失的细胞模型,用于SPACR信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

    主要特点

    • 针对对 SPACR 功能至关重要的 IMPG1 外显子的 sgRNA
      通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
      GFP 报告基因用于识别转染细胞
      针对多个 IMPG1 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
      兼容转染递送

    设计变体

    CRISPRs +/- HDR

    • 由 SPACR CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 SPACR CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 IMPG1 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
      由 SPACR HDR 质粒(h)编码的 HDR 供体构建体以及 SPACR HDR质粒(h2)编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因,其两侧由IMPG1同源臂包围,以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定IMPG1靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。