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Sox2双切口酶质粒(m2) | sc-423086-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
小鼠Sox2基因编码SRY-box转录因子SOX2,它是多能性与自我更新的核心调控因子,可与OCT4和NANOG协同作用以维持胚胎干细胞身份,并抑制过早的谱系承诺;SOX2通过结合增强子和启动子元件来调控转录程序,这些程序支配神经外胚层的指定、神经干/祖细胞的维持以及染色质状态转换,同时还与WNT、FGF、BMP和SHH等信号输入发生联系,从而塑造发育模式;Sox2表达水平或剂量的失衡与早期胚胎发生和神经发育缺陷相关,而SOX2调控网络的改变也常在癌症生物学中作为干样状态研究的重要内容;对小鼠Sox2进行基因编辑有助于在发育与疾病模型体系中对转录调控回路、增强子功能、细胞命运决策以及重编程流程开展机制性解析。
Sox2 双切酶质粒(m2)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Sox2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Sox2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Sox2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Sox2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。