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Sox-30CRISPR激活质粒(h) | sc-405112-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
人类 SOX30 编码 Sox-30,它是 SOX 家族中的序列特异性转录因子,参与调控发育相关的基因表达程序,并在生殖细胞分化和精子发生中发挥重要作用。Sox-30 通过结合增强子和启动子元件来调节转录网络,从而协同控制细胞命运决定、谱系承诺,以及与染色质相关的阶段特异性基因表达调控。已有研究报道,在多种肿瘤背景下 SOX30 的表达发生失调;此时 Sox-30 依赖的转录调控被改变,并与细胞增殖、凋亡及分化状态的变化相关。这些特征使 SOX30 成为研究转录调控回路、发育信号通路的串扰,以及分化程序与致癌表型之间联系机制的一个有价值的关键节点。
Sox-30 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SOX30的表达。
Sox-30 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SOX30基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SOX30转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Sox-30表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SOX30位点,并能够研究内源性位点上依赖于Sox-30的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SOX30表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Sox-30通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。