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Sox-1CRISPR激活质粒(h) | sc-401473-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
Sox-1CRISPR激活质粒(h2) | sc-401473-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
SOX1 编码 Sox-1 转录因子,这是一种具有高迁移率族(HMG)盒 DNA 结合结构域的蛋白,在早期神经外胚层的命运指定以及神经祖细胞身份的维持中起核心作用。Sox-1 调控一系列转录程序,控制细胞命运承诺、分化时序以及神经管模式化,并在更广泛的发育信号网络中发挥功能,这些网络与 Wnt、Notch 和 Shh 等通路相互交织。在人类生物学中,SOX1 表达及其谱系程序的异常与神经发育失调的研究相关,也与具有干细胞样特征的癌症中所观察到的情境特异性转录重编程有关。作为谱系标志物与调控因子,SOX1 被广泛用于模拟神经分化轨迹,并用于在干细胞与祖细胞体系中解析基因调控网络。
Sox-1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SOX1的表达。
Sox-1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SOX1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SOX1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性Sox-1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SOX1位点,并能够研究内源性位点上依赖于Sox-1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SOX1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Sox-1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。