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SOCS-1CRISPR激活质粒(h) | sc-400618-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
SOCS-1CRISPR激活质粒(h2) | sc-400618-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
人类 SOCS1 基因编码 SOCS-1,它是细胞内关键的细胞因子受体信号负调控因子。SOCS-1 通过其 SH2 结构域介导对磷酸酪氨酸基序的识别,并借助 SOCS box 促进泛素–蛋白酶体途径的靶向降解,从而限制 JAK/STAT 通路活性。通过减弱干扰素、白细胞介素及其他炎症信号下游的传导,SOCS-1 有助于维持免疫稳态、调节抗原呈递细胞功能,并抑制过度的炎症性转录程序。SOCS1 表达或活性失调与异常免疫激活以及肿瘤相关信号环境有关,在这些环境中,持续的 STAT 激活会导致增殖与存活调控发生改变。这些特性使 SOCS-1 成为研究反馈抑制、细胞因子应答以及免疫与肿瘤生物学模型中转录适应的一个有用节点。
SOCS-1 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SOCS1的表达。
SOCS-1 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SOCS1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SOCS1转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性SOCS-1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SOCS1位点,并能够研究内源性位点上依赖于SOCS-1的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SOCS1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟SOCS-1通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。