
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SNX17CRISPR激活质粒(h) | sc-403452-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
SNX17(sorting nexin 17)是一种含 PX 结构域的内体适配蛋白,能够结合磷脂酰肌醇类脂质并识别 NPxY 基序,从而调控多种膜蛋白的内吞回收。通过与 Retriever/CCC 复合体及与 retromer 相关的转运机器相互作用,SNX17 促进受体从早期内体被分选并返回质膜,从而塑造信号输出、营养摄取以及细胞—基质通讯。通过调节 LDL 受体家族成员和整合素等货物在细胞表面的可用性,SNX17 影响与脂质稳态、细胞迁移和细胞骨架组织相关的通路。SNX17 依赖性转运失调与受体信号改变有关,并已在代谢表型、神经生物学以及与癌症相关的细胞行为等研究背景中得到探讨。
SNX17 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SNX17的表达。
SNX17 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SNX17基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SNX17转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性SNX17表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SNX17位点,并能够研究内源性位点上依赖于SNX17的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SNX17表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟SNX17通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。