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SNX1双切口酶质粒(h) | sc-404470-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
SNX1双切口酶质粒(h2) | sc-404470-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
分选连接蛋白1(Sorting nexin 1,SNX1)是一种含PX结构域的内体蛋白,可结合磷脂酰肌醇-3-磷酸(PI3P),并与retromer复合体协同作用,调控内体分选以及从内体到反式高尔基网络(TGN)的逆向运输。SNX1通过塑造内体膜管并影响受体转运,帮助控制多种信号受体的回收与下调,因此与EGFR及其他受体酪氨酸激酶网络等通路相关。SNX1依赖的转运会影响细胞稳态过程,包括膜蛋白周转、营养摄取和信号衰减。在癌症生物学和神经退行性疾病相关研究中,SNX1的表达或功能失调与受体信号改变及内体动力学异常有关。
SNX1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SNX1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SNX1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SNX1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SNX1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。