
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SNFTCRISPR激活质粒(h) | sc-403344-ACT | 20 µg | CNY2986.00 | |||
SNFTCRISPR激活质粒(h2) | sc-403344-ACT-2 | 20 µg | CNY2986.00 |
BATF3 编码一种碱性亮氨酸拉链(bZIP)转录因子,可调控与免疫谱系决定及对刺激作出反应的转录相关的基因表达程序。在人类细胞中,BATF3 参与细胞因子信号与模式识别受体信号下游的转录网络,影响抗原加工/呈递、与干扰素相关的应答以及更广泛的炎症通路。BATF3 依赖性程序的扰动与免疫监视改变及炎症状态失衡有关,因此在肿瘤–免疫相互作用和感染相关免疫病理的研究中具有意义。作为转录调控因子,BATF3 常被用于研究其对细胞命运决定、染色质相关基因调控以及对微环境线索的情境依赖性应答的影响。
SNFT CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性BATF3的表达。
SNFT CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的BATF3基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于BATF3转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性SNFT表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的BATF3位点,并能够研究内源性位点上依赖于SNFT的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在BATF3表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟SNFT通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。