Date published: 2026-7-25

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SMPDL3B CRISPR/Cas9 KO质粒 (m): sc-430315

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • SMPDL3B CRISPR/Cas9 基因敲除(KO)质粒(m) 是一组质粒混合物,每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA(gRNA),其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列,旨在实现最高的基因敲除效率
  • gRNA序列引导Cas9在SMPDL3B基因组位点诱导位点特异性双链断裂(DSBs),从而通过非同源末端连接(NHEJ)实现基因敲除
  • 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点,因此在建立稳定的基因敲除细胞系后,可以通过 Cre 重组酶(Cre 向量:sc-418923)去除选择标记。
  • 转染后,基因敲除效率可以用抗体:SMPDL3B: sc-137113,通过WB, IF或者IHC分析
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    SMPDL3B CRISPR/Cas9 KO质粒 (m)

    sc-430315
    20 µg
    CNY2986.00

    概述

    Smpdl3b 编码鞘磷脂磷酸二酯酶酸样 3B(sphingomyelin phosphodiesterase acid-like 3B,SMPDL3B),这是一种与膜相关的磷酸二酯酶,被认为参与调控细胞表面鞘脂与磷脂代谢。研究表明,SMPDL3B 可通过影响膜脂组成及受体的空间组织,调节 Toll 样受体信号通路、影响巨噬细胞的激活状态,并在维持炎症反应稳态方面发挥作用。在小鼠免疫与肾脏生物学研究中,SMPDL3B 活性改变与先天免疫反应性变化以及足细胞功能异常相关,提示脂质重塑可与组织损伤和炎症发生相联系。因此,Smpdl3b 常被用于研究脂质信号、内体/溶酶体运输以及与炎症和代谢性疾病模型相关的免疫细胞表型等交叉通路。

    SMPDL3B CRISPR/Cas9 KO质粒(m)是一组旨在针对性地破坏mouse细胞系中Smpdl3b基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA(sgRNA),该sgRNA针对Smpdl3b基因内的特定位点,并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP,可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。

    多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后,产生破坏Smpdl3b开放阅读框的插入或缺失(indels)的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接(NHEJ)途径修复,通常会导致移码突变,从而使SMPDL3B蛋白表达失活。

    该CRISPR敲除系统能够高效构建Smpdl3b缺失的细胞模型,用于SMPDL3B信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。

    主要特点

    • 针对对 SMPDL3B 功能至关重要的 Smpdl3b 外显子的 sgRNA
      通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
      GFP 报告基因用于识别转染细胞
      针对多个 Smpdl3b 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
      兼容转染递送

    设计变体

    CRISPRs +/- HDR

    • 由 SMPDL3B CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m) 和 SMPDL3B CRISPR/Cas9 KO 质粒 (m2) 编码的 gRNA 分别靶向 Smpdl3b 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
      由 SMPDL3B HDR 质粒(m)编码的 HDR 供体构建体以及 SMPDL3B HDR质粒(m2)编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因,其两侧由Smpdl3b同源臂包围,以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定Smpdl3b靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。