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SMC6双切口酶质粒(h) | sc-402805-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
SMC6双切口酶质粒(h2) | sc-402805-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
SMC6 编码一种染色体结构维持(SMC)核心蛋白,并与 SMC5 配对形成 SMC5/6 复合体,这是基因组稳定性的关键调控因子。该复合体通过协调同源重组、稳定停滞的复制叉,并促进解决由复制压力产生的 DNA 中间体,从而支持 DNA 复制与修复。SMC6 还参与染色体分离和端粒维护,使其功能与细胞周期进程及染色体完整性的维持密切相关。SMC5/6 通路组分的破坏或失调会导致基因组不稳定性升高,这一特征与 DNA 损伤应答缺陷及染色体维持相关疾病的研究密切相关。
SMC6 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SMC6 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SMC6内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SMC6的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SMC6基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。