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Smad7双切口酶质粒(h) | sc-400251-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
Smad7双切口酶质粒(h2) | sc-400251-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
SMAD7 编码 Smad7,这是一种抑制性 SMAD,可通过干扰受体介导的受体调控型 SMAD(R-SMAD)的磷酸化并促进受体周转,对 TGF-β 和 BMP 信号通路提供负反馈调控。通过调节 SMAD 依赖的转录,Smad7 影响上皮–间质转化、细胞外基质重塑、免疫与炎症信号以及细胞周期调控。SMAD7 活性失衡与纤维化反应改变和炎症表型相关,并可通过影响 TGF-β 通路输出在肿瘤进展中呈现情境依赖性的作用。作为通路检查点,SMAD7 常被用于解析经典 TGF-β/SMAD 网络中信号强度与时序,并研究其与 MAPK 和 NF-κB 通路的串扰。
Smad7 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SMAD7 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SMAD7内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SMAD7的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SMAD7基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。