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SLX4IPCRISPR激活质粒(h) | sc-407109-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
人类 SLX4IP(SLX4 相互作用蛋白)是一种核内因子,通过与结构特异性内切核酸酶网络及 DNA 修复支架的相互作用参与维持基因组完整性。研究表明,它与调控复制相关 DNA 损伤应答、端粒稳态,以及在复制压力下可能出现的复杂 DNA 结构的解析等通路有关。SLX4IP 表达的改变与端粒长度调控机制相关,而端粒长度调控会影响细胞增殖能力和基因组稳定性表型。这些功能使 SLX4IP 成为研究 DNA 修复通路连接方式、染色体稳定性以及与癌症和其他基因组不稳定相关疾病有关的应激适应程序的有用靶点。
SLX4IP CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SLX4IP的表达。
SLX4IP CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的SLX4IP基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于SLX4IP转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性SLX4IP表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的SLX4IP位点,并能够研究内源性位点上依赖于SLX4IP的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SLX4IP表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟SLX4IP通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。