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SLPI双切口酶质粒(h) | sc-418559-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
SLPI双切口酶质粒(h2) | sc-418559-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
分泌性白细胞肽酶抑制剂(SLPI)是一种小分子分泌型丝氨酸蛋白酶抑制剂,可通过限制中性粒细胞弹性蛋白酶、组织蛋白酶G(cathepsin G)及相关蛋白酶的活性,帮助维持上皮与黏膜屏障的稳态。除抗蛋白酶作用外,SLPI还可调控先天免疫信号传导和炎症基因表达,从而影响伤口修复、抗微生物防御以及白细胞募集等过程。在炎症性气道与皮肤疾病、慢性黏膜炎症以及感染相关的组织重塑中,均有SLPI表达异常的报道,使其成为研究蛋白酶—抗蛋白酶平衡的一个有用分子节点。因此,SLPI与上皮生物学、免疫调控以及塑造疾病相关炎症的微环境因素研究密切相关。
SLPI 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SLPI 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SLPI内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SLPI的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SLPI基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。