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SLM-2CRISPR激活质粒(h) | sc-407141-ACT | 20 µg | CNY2986.00 |
人类 KHDRBS3 基因编码 SLM-2,它属于 STAR 家族的 RNA 结合蛋白,可通过识别 pre-mRNA 上的特定序列基序来调控可变剪接与 RNA 加工。SLM-2 以组织与情境依赖的方式影响转录本同工型的选择,从而塑造与神经元功能相关以及更广泛的转录后基因调控程序。通过调节剪接位点选择与 mRNA 成熟过程,KHDRBS3 能影响信号输出与蛋白质组多样性,因此对研究 RNA 调控网络以及复杂疾病中常见的剪接失调具有重要意义。关于 SLM-2 的表达改变或剪接因子失衡,已有研究将其用于探讨转录与 RNA 加工的耦联机制,以及与疾病相关的同工型转换。
SLM-2 CRISPR激活质粒(h)提供了一种靶向、非破坏性的方法,可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性KHDRBS3的表达。
SLM-2 CRISPR激活质粒(h)是一个由三条质粒组成的协同激活介导(SAM)系统,旨在对人类细胞系中的KHDRBS3基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变(D10A 和 N863A)的无催化活性的 Cas9(dCas9)为核心,这些突变消除了核酸酶活性,同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合,并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用,并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA,其与两个MS2 RNA适配体融合,这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点,并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送,以确保系统所有组分的平衡表达。
在靶位点组装完成后,SAM复合物结合于KHDRBS3转录起始位点上游约200 bp处,VP64、p65和HSF1在此协同作用,招募转录 machinery并驱动内源性SLM-2表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同, dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列,从而保留了原生的KHDRBS3位点,并能够研究内源性位点上依赖于SLM-2的转录反应,使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在KHDRBS3表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟SLM-2通路恢复的宝贵工具。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。