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SLC26A3双切口酶质粒(h) | sc-403891-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
SLC26A3双切口酶质粒(h2) | sc-403891-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 SLC26A3 编码一种膜性阴离子交换体(DRA),介导电中性的氯离子/碳酸氢根交换,并参与肠道上皮电解质吸收及腔内 pH 稳态维持。通过调控跨上皮离子通量,SLC26A3 与胃肠道中体液平衡、黏液层稳定性以及上皮屏障功能等过程相互关联。SLC26A3 活性异常与先天性氯离子腹泻相关,并被认为参与结肠更广泛的上皮失调机制,包括炎症及肿瘤相关情境。作为影响局部离子微环境的转运体,SLC26A3 亦与肠上皮细胞分化、转运体网络以及离子耦联信号传导等研究相关。
SLC26A3 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SLC26A3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SLC26A3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SLC26A3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SLC26A3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。