非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
SKIP 抗体 (B-6): sc-365362. 未转染: sc-110760 (A) 和转染人 SKIP: sc-158962 (B) 293 全细胞裂解液中 SKIP 表达的 Western 印迹分析.
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
非 CRISPR 数据：图片说明了可视化 CRISPR 实验结果的抗体质量。
SKIP CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-407373
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- SKIP CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在SKIP基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：SKIP: sc-365362，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SKIP CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-407373 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
INPP5K 编码肌醇多磷酸-5-磷酸酶 K，通常称为 SKIP。SKIP 是一种磷脂酰肌醇（phosphoinositide）磷酸酶，可通过去磷酸化 PtdIns(4,5)P₂ 及相关底物来调控细胞内的磷脂酰肌醇信号。SKIP 通过调节膜上磷脂酰肌醇的组成，影响肌动蛋白细胞骨架的组织、膜运输以及 PI3K/AKT 等依赖局部脂质第二信使的下游信号转导。INPP5K 活性异常与肌肉及神经发育稳态紊乱相关，因此在研究影响神经肌肉功能和细胞结构的先天性疾病中具有意义。由于磷脂酰肌醇协调多个细胞区室与过程，SKIP 也是解析人类细胞中膜—细胞骨架耦联以及由磷酸酶调控的信号动态的一个有用节点。
SKIP CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中INPP5K基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对INPP5K基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏INPP5K开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使SKIP蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建INPP5K缺失的细胞模型，用于SKIP信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 SKIP 功能至关重要的 INPP5K 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 INPP5K 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 SKIP CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 SKIP CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 INPP5K 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 SKIP HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 SKIP HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由INPP5K同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定INPP5K靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。