Siglec-1CRISPR激活质粒(h): sc-402497-ACT

SIGLEC1 编码 Siglec-1（CD169），这是一种结合唾液酸的免疫球蛋白样凝集素，选择性表达于巨噬细胞以及特定树突状细胞群体。它介导对宿主细胞和病原体表面唾液酸化糖缀合物的识别与捕获。通过参与黏附、内吞和抗原处理等过程，Siglec-1 有助于先天免疫感知、细胞—细胞相互作用，并在组织微环境中塑造炎症反应。它通常与 I 型干扰素驱动的激活程序以及巨噬细胞极化状态相关，因此是髓系免疫生物学中一个有用的标志物和功能节点。SIGLEC1 表达失调与慢性炎症和自身免疫性疾病、感染性疾病进程以及肿瘤相关巨噬细胞表型有关，支持其在免疫学与疾病机制研究中的重要性。

Siglec-1 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性SIGLEC1的表达。

Siglec-1 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的SIGLEC1基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于SIGLEC1转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Siglec-1表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的SIGLEC1位点，并能够研究内源性位点上依赖于Siglec-1的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在SIGLEC1表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Siglec-1通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。