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SID-2慢病毒激活颗粒(h) | sc-407959-LAC | 200 µl | CNY3422.00 |
SIDT2(SID-2)编码一种溶酶体/内溶酶体膜蛋白,参与内吞通路中的核酸处理过程,包括细胞外双链 RNA 及相关寡核苷酸的摄取与细胞内运输。通过将膜转运与溶酶体稳态相耦联,SID-2 被认为与囊泡成熟、自噬-溶酶体功能以及对异常核酸作出反应的先天免疫感知通路等过程相关。SIDT2 活性改变与溶酶体贮积失衡和炎症信号异常有关,因此与神经退行性变、代谢功能障碍以及宿主–病原体相互作用等研究领域具有相关性。这些联系使 SIDT2 成为解析人细胞中内体运输与核酸驱动的应激反应的一个有用节点。
SID-2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 SIDT2 表达。
SID-2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在SIDT2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性SID-2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 SIDT2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。