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SHIP-2双切口酶质粒(m) | sc-421138-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
SHIP-2双切口酶质粒(m2) | sc-421138-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
Inppl1 编码 SHIP-2(含 SH2 结构域的肌醇 5-磷酸酶 2),这是一种脂质磷酸酶,可将 PI(3,4,5)P3 转化为 PI(3,4)P2,从而调节受体酪氨酸激酶及免疫受体下游的磷脂酰肌醇信号传导。通过调控 PI3K–AKT 通路的信号强度以及在质膜处的空间信号分布,SHIP-2 影响胰岛素信号、葡萄糖稳态、细胞黏附与细胞骨架动态。在小鼠组织中,SHIP-2 活性与代谢调控和炎症信号有关;INPPL1/SHIP-2 功能异常也常在胰岛素抵抗、肥胖相关表型以及癌症相关信号网络重编程等背景下被研究。这些作用使 Inppl1 成为解析生长因子信号、内吞作用与肌动蛋白重塑之间通路串扰的一个重要节点。
SHIP-2 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Inppl1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Inppl1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Inppl1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Inppl1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。