Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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SERCA2双切口酶质粒(h): sc-400417-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- SERCA2 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- SERCA2双切酶质粒（h）和SERCA2双切酶质粒（h2）编码针对ATP2A2的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：SERCA2: sc-376235，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SERCA2双切口酶质粒(h) | sc-400417-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
SERCA2双切口酶质粒(h2) | sc-400417-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ATP2A2 编码人类肌浆/内质网 Ca2+ ATPase SERCA2，这是一种 P 型 ATP 酶，负责将胞质 Ca2+ 转运进入内质网腔内，以维持 Ca2+ 储存与信号传导的稳态。通过塑造内质网 Ca2+ 负荷，SERCA2 调控兴奋–收缩耦联、储存操纵性 Ca2+ 内流（SOCE）动力学，以及 Ca2+ 依赖的蛋白质折叠、分泌和与内质网应激反应相关的细胞存活通路。ATP2A2 的扰动会破坏细胞内 Ca2+ 振荡，并可改变包括钙调神经磷酸酶/核因子活化 T 细胞（calcineurin/NFAT）及未折叠蛋白反应（UPR）在内的下游信号网络。ATP2A2 变异与达里埃病（Darier disease）相关，并在内质网 Ca2+ 处理影响心脏与上皮生理的情境中被提示参与其中，因而支持对 Ca2+ 信号与蛋白稳态（proteostasis）机制的研究。
SERCA2 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ATP2A2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ATP2A2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ATP2A2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ATP2A2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。