Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
SERCA1 Antibody (A-6): sc-515162. Near-infrared western blot analysis of SERCA1 expression in human skeletal muscle (A), rat skeletal muscle (B) and mouse skeletal muscle (C) tissue extracts. Detection reagent used: m-IgGλ BP-CFL 680: sc-516194.
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SERCA1双切口酶质粒(h): sc-401416-NIC
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- SERCA1 双切口酶质粒（h）含有一对质粒，分别编码D10A突变的Cas9核酸酶，和目标特异的 20 nt 向导RNA （gRNA），与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比，它在基因敲除方面具有更好的特异性
- 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补，从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂（DSB），介导特异的基因组DNA双切割
- 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因；另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
- SERCA1双切酶质粒（h）和SERCA1双切酶质粒（h2）编码针对ATP2A1的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：SERCA1: sc-515162，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SERCA1双切口酶质粒(h) | sc-401416-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
SERCA1双切口酶质粒(h2) | sc-401416-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
ATP2A1 编码肌浆网/内质网 Ca²⁺-ATP 酶 SERCA1，它是一种 P 型 ATP 酶，负责将胞质中的 Ca²⁺ 泵入肌浆网，从而在兴奋之后恢复较低的静息 Ca²⁺ 水平。通过驱动 Ca²⁺ 的隔离/储存，SERCA1 调控兴奋–收缩耦联、Ca²⁺ 依赖性信号传导，以及影响蛋白稳态与应激反应的 ER/SR Ca²⁺ 稳态。SERCA1 的功能与控制钙循环和肌肉能量代谢的通路相互整合，包括与雷诺定受体介导的 Ca²⁺ 释放以及肌钙集蛋白（calsequestrin）的缓冲作用相耦联。ATP2A1 活性或表达的改变与骨骼肌功能障碍表型相关，因此它是研究钙处理机制与肌纤维生理的一个有用靶点。
SERCA1 双切酶质粒（h）由一对匹配的质粒组成，专为在 human 细胞系中对 ATP2A1 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ATP2A1内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时，会产生错位的单链切口，从而共同形成错位双链断裂，这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径（最常见的是非同源末端连接（NHEJ））得到修复，从而导致插入或缺失，进而破坏ATP2A1的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合，双切口方法提高了编辑特异性，并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞，其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化，而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集，并简化了ATP2A1基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。