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Septin 5双切口酶质粒(h) | sc-402514-NIC | 20 µg | CNY3084.00 |
人类 **SEPT5** 基因编码 septin 5,这是一种结合 GTP 的细胞骨架蛋白,可组装成由多种 septin 构成的异源寡聚 septin 丝状结构,并参与膜结构组织、囊泡运输,以及对肌动蛋白与微管动态的空间调控。Septin 5 在神经元与分泌相关环境中富集,并且通过与 SNARE 相关机制相互作用,被认为与突触囊泡的胞吐与停靠有关。依赖 SEPT5 的 septin 支架还会影响细胞极性、胞质分裂以及质膜处的区室化,这些过程共同塑造细胞内运输与信号传播。研究报道显示,SEPT5 的表达异常或基因位点受损与神经发育和神经精神疾病研究背景相关,也出现在癌症相关表达数据集中,支持将其作为研究细胞骨架重塑与分泌机制的关键节点。
Septin 5 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SEPT5 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SEPT5内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SEPT5的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SEPT5基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。