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SEMA6D双切口酶质粒(m) | sc-431980-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
SEMA6D双切口酶质粒(m2) | sc-431980-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
Sema6d 编码小鼠 semaphorin 蛋白 SEMA6D,这是一种跨膜型导向线索分子,可通过 plexin 受体传递信号,调控依赖接触的细胞—细胞通讯。SEMA6D 通过影响细胞骨架重塑、定向迁移和轴突寻径,将 semaphorin–plexin 信号与 Rho 家族 GTP 酶活性及其下游肌动蛋白动态变化联系起来。除神经模式化之外,SEMA6D 还参与组织形态发生以及血管和免疫相关过程,在这些过程中,导向通路决定细胞定位。semphorin 信号的失调(包括 Sema6d 表达改变)常用于在疾病相关模型中探究异常神经支配、炎性细胞转运以及微环境重塑等机制。
SEMA6D 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Sema6d 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Sema6d内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Sema6d的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Sema6d基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。