Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
SELB Antibody (F-4): sc-365707. Western blot analysis of SELB expression in untreated K-562 (A), chemically-treated K-562 (B), untreated HCT-116 (C), chemically-treated HCT-116 (D) and HeLa (E) whole cell lysates. β-Actin (C4): sc-47778 used as loading control. Detection reagent used: m-IgG Fc BP-HRP: sc-525409.
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SELB CRISPR/Cas9 KO质粒 (h): sc-409155
- 针对种属：human
- 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA，最多可供20次转染
- SELB CRISPR/Cas9 基因敲除（KO）质粒（h） 是一组质粒混合物，每种质粒均编码 Cas9 核酸酶及针对特定靶点的 20 核苷酸引导 RNA（gRNA），其设计基于 GeCKO v2 文库中的序列，旨在实现最高的基因敲除效率
- gRNA序列引导Cas9在SELB基因组位点诱导位点特异性双链断裂（DSBs），从而通过非同源末端连接（NHEJ）实现基因敲除
- 嘌呤霉素抗性基因和 RFP 基因两侧有 LoxP 位点，因此在建立稳定的基因敲除细胞系后，可以通过 Cre 重组酶（Cre 向量：sc-418923）去除选择标记。
- 转染后，基因敲除效率可以用抗体：SELB: sc-166521，通过WB, IF或者IHC分析
订购信息
| 产品名称 | 产品编号 | 规格 | 价格 | 数量 | 收藏夹 | |
SELB CRISPR/Cas9 KO质粒 (h) | sc-409155 | 20 µg | CNY2986.00 |
概述
EEFSEC 编码硒半胱氨酸特异性翻译延伸因子 SELB（eEFSec），它是专门翻译机制的核心组成部分，使人类硒蛋白在合成过程中能够在 UGA 密码子处插入硒半胱氨酸。SELB 与 SECIS 结合因子及 Sec-tRNA 协同作用，支持翻译重编码，从而通过硒酶的生成影响细胞氧化还原稳态、氧化应激反应以及蛋白质质量控制。通过调控抗氧化与硫醇-氧化还原通路的产出，EEFSEC 的活性会影响细胞对氧化损伤的易感性及应激适应性信号传导。硒蛋白生物合成失调与炎症基调改变及代谢表型相关，因此 EEFSEC 是研究疾病相关氧化还原生物学机制的一个重要靶点。
SELB CRISPR/Cas9 KO质粒（h）是一组旨在针对性地破坏human细胞系中EEFSEC基因的质粒池。每条质粒均共表达一种独特的单引导RNA（sgRNA），该sgRNA针对EEFSEC基因内的特定位点，并携带来自化脓性链球菌的Cas9核酸酶。这些质粒还编码GFP，可通过荧光显微镜或流式细胞术对成功转染的细胞进行荧光标记和富集。
多引导设计提高了在Cas9介导的双链断裂形成后，产生破坏EEFSEC开放阅读框的插入或缺失（indels）的概率。CRISPR/Cas9系统引入的DNA断裂通过内源性非同源末端连接（NHEJ）途径修复，通常会导致移码突变，从而使SELB蛋白表达失活。
该CRISPR敲除系统能够高效构建EEFSEC缺失的细胞模型，用于SELB信号传导研究、功能基因组学研究、癌症生物学研究以及人类细胞系中治疗反应的评估。
主要特点
- 针对对 SELB 功能至关重要的 EEFSEC 外显子的 sgRNA
通过单质粒共表达 SpCas9 和 sgRNA 以简化递送过程
GFP 报告基因用于识别转染细胞
针对多个 EEFSEC 基因组位点的质粒池以提高敲除效率
兼容转染递送
设计变体
CRISPRs +/- HDR
- 由 SELB CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h) 和 SELB CRISPR/Cas9 KO 质粒 (h2) 编码的 gRNA 分别靶向 EEFSEC 基因座内的不同位点。可能提供其中一种或两种靶向设计。具体供应情况请参见相关产品。
由 SELB HDR 质粒（h）编码的 HDR 供体构建体以及 SELB HDR质粒（h2）编码的HDR供体构建体包含一个嘌呤霉素抗性盒和一个RFP报告基因，其两侧由EEFSEC同源臂包围，以支持在与CRISPR/Cas9敲除设计对应的特定EEFSEC靶位点进行同源导向修复。HDR供体的供应情况可能有所不同。请查看“相关产品”了解供应情况。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。