Date published: 2026-9-8

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SEC16A双切口酶质粒(m): sc-432718-NIC

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说明书
  • 针对种属:mouse
  • 20 µg 纯化的即用型的质粒DNA,最多可供20次转染
  • SEC16A 双切口酶质粒(m)含有一对质粒,分别编码D10A突变的Cas9核酸酶,和目标特异的 20 nt 向导RNA (gRNA),与其相应的/%base_sku_name%/ CRISPR/Cas9敲除质粒相比,它在基因敲除方面具有更好的特异性
  • 成对的向导RNA序列与目标基因中约20个碱基对互补,从而使Cas9可以模仿DNA双链断裂(DSB),介导特异的基因组DNA双切割
  • 质粒对中的一个包含供筛选使用的嘌呤霉素抗性基因;另一个包含供观察转染使用的绿色荧光蛋白标记
  • SEC16A双切酶质粒(m)和SEC16A双切酶质粒(m2)编码针对Sec16a的不同配对gRNA设计。其中一种或两种设计可能均有提供
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    SEC16A双切口酶质粒(m)

    sc-432718-NIC
    20 µg
    CNY3084.00

    SEC16A双切口酶质粒(m2)

    sc-432718-NIC-2
    20 µg
    CNY3084.00

    Sec16a 编码 SEC16A,它是内质网出口位点(ER exit sites)的核心支架蛋白,负责组织 COPII 被膜的组装,从而启动内质网到高尔基体(ER-to-Golgi)的运输。SEC16A 通过协调 SEC23/SEC24 与 SEC13/SEC31 的募集与动态变化,调控分泌通路的通量以及运输载体的生成;这些载体支持膜运输、细胞器稳态和蛋白质稳态。早期分泌运输的改变会扰乱脂质代谢、细胞外基质分泌以及受体在细胞表面的呈递等过程,而这些过程与应激适应和细胞状态转换密切相关。因此,在小鼠模型中,SEC16A 常被用于研究连接内质网组织与自噬、未折叠蛋白反应(UPR)信号,以及依赖运输过程对细胞生长与分化进行调控的相关通路。

    SEC16A 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Sec16a 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Sec16a内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Sec16a的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。

    为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Sec16a基因失活克隆的验证流程。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。