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SCCA1双切口酶质粒(h) | sc-403601-NIC | 20 µg | CNY3084.00 | |||
SCCA1双切口酶质粒(h2) | sc-403601-NIC-2 | 20 µg | CNY3084.00 |
SERPINB3 编码鳞状细胞癌抗原 1(SCCA1),属于 B 类群丝氨酸蛋白酶抑制剂(serpin),主要作为细胞内蛋白酶抑制剂发挥作用。SCCA1 可调控由蛋白酶驱动的多种过程,这些过程与上皮分化、炎症反应以及细胞应激应对相关,包括对溶酶体和胞质蛋白酶活性的保护作用。通过塑造蛋白质稳态(proteostasis)与细胞存活信号通路,SERPINB3 常被用于研究上皮重塑及免疫微环境失衡等情境。SCCA1 表达异常与鳞状上皮相关病理及肿瘤相关表型有关,因此可作为疾病相关模型中的机制性标志物加以应用。
SCCA1 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 SERPINB3 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对SERPINB3内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏SERPINB3的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了SERPINB3基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。